Предоперационная подготовка клеточных трансплантатов лимба для лечения оптических нейропатий (экспериментальное исследование)

Авторы

  • С.А. Борзенок ФГАУ «НМИЦ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова» Минздрава России, Москва; ГБОУ ВПО «Московский государственный медико-стоматологический университет им А.И. Евдокимова «Минздрава России, Москва
  • М.Х. Хубецова ФГАУ «НМИЦ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова» Минздрава России, Москва
  • И.Н. Сабурина ФГБНУ «Научно-исследовательский институт общей патологии и патофизиологии», Москва; ФГБОУ ДПО «Российская медицинская академия последипломного образования» Минздрава России
  • Н.А. Гаврилова ГБОУ ВПО «Московский государственный медико-стоматологический университет им А.И. Евдокимова «Минздрава России, Москва
  • Ю.А. Комах ФГАУ «НМИЦ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова» Минздрава России, Москва
  • Х.Д. Тонаева ФГАУ «НМИЦ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова» Минздрава России, Москва
  • Д.С. Островский ФГАУ «НМИЦ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова» Минздрава России, Москва
  • Н.И. Ланевская ФГАУ «НМИЦ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова» Минздрава России, Москва; ГБОУ ВПО «Московский государственный медико-стоматологический университет им А.И. Евдокимова «Минздрава России, Москва
  • Л.Н. Скуратовская ФГБНУ «Научно-исследовательский институт общей патологии и патофизиологии», Москва
  • В.С. Репин ФГАУ «НМИЦ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова» Минздрава России, Москва; ФГБНУ «Научно-исследовательский институт общей патологии и патофизиологии», Москва; ФГБОУ ДПО «Российская медицинская академия последипломного образования» Минздрава России

Ключевые слова:

мультипотентные мезенхимальные стволовые клетки лимба, 3D-культуры, клеточные сфероиды, фактор роста нервов (ФРН), нейроростовой фактор головного мозга (НФГМ), клеточная терапия, нейропротекция, оптическая нейропатия

Аннотация

Цель. Изучить в эксперименте in vitro секрецию фактора роста нервов (ФРН) и нейроростового фактора головного мозга (НФГМ) интактными и индуцированными мультипотентными мезенхимальными стволовыми клетками лимба (ММСК) в трехмерной культуре (3D).
Материал и методы. ММСК получали путем культивирования
фрагментов лимба, выделенных из трупных донорских глаз человека согласно медицинской технологии Глазного тканевого банка ФГАУ
«МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова» Минздрава России. Фенотип полученной клеточной культуры изучали с помощью метода проточной цитофлуориметрии. Стимуляцию секреции нейротрофических факторов проводили по двухэтапной методике с использованием неспецифических факторов активации: EGF,
hbFGF, добавка N2, дибутирил цАМФ, NRG1-beta 1, PDGF, 3-изобутил-1-метилксантин. 3D-клеточные сфероиды создавали с использованием агарозных планшетов (3D Petri dishes, Microtissue, США) для
трех групп сравнения, где I группа – контрольная, II группа – с индукцией сфероидов на 1 сутки культивирования; III группа – с индукцией сфероидов на 7 сутки культивирования. Концентрацию ФРН и
НФГМ в среде культивирования изучали методом иммуноферментного анализа (ИФА).
Результаты. Индукция 3D-сфероидов ММСК лимба, проведенная
на 1 и 7 сутки инкубирования, способствует значительному увеличению продукции ФРН и НФГМ, однако в дальнейшем наблюдается выраженное снижение секреции этих факторов. Проведение индукции приводит к изменению морфологии сфероидов: потере компактности, появлению «бахромчатости» (дебриса). Подобные изменения свидетельствуют о нежизнеспособности полученных 3D-клеточных сфероидов.
Заключение. Клеточные сфероиды, созданные из 2D-культуры
интактных ММСК лимба методом трехмерного культивирования, способны в достаточных терапевтических концентрациях спонтанно синтезировать ФРН и НФГМ, являются наиболее оптимальной конструкцией для трансплантации в экстрабульбарные и интраокулярные тканевые ниши глазного яблока, являются потенциальным источником
пролонгированной секреции нейроростовых факторов в клеточной
терапии оптических нейропатий.

Загрузки

Опубликован

2022-01-02

Выпуск

№ 2 (2017): Офтальмохирургия

Раздел

Статьи

Категории

Лицензия

Лицензия Creative Commons

Это произведение доступно по лицензии Creative Commons «Attribution-NonCommercial» («Атрибуция — Некоммерческое использование») 4.0 Всемирная.

Наиболее читаемые статьи этого автора (авторов)

1 2 3 > >>