Переживаемость кератоцитов и эндотелиальных клеток заднего послойного трансплантата роговицы, культивированных в модифицированной консервационной среде

Авторы

  • С.А. Борзенок ФГАУ «НМИЦ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова» Минздрава России, Москва
  • Б.Э. Малюгин ФГАУ «НМИЦ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова» Минздрава России, Москва
  • Д.С. Островский ФГАУ «НМИЦ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова» Минздрава России, Москва
  • А.К. Ахмедов ФГАУ «НМИЦ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова» Минздрава России, Москва
  • Х.Д. Тонаева ФГАУ «НМИЦ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова» Минздрава России, Москва
  • Ю.А. Комах ФГАУ «НМИЦ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова» Минздрава России, Москва
  • М.Х. Хубецова ФГАУ «НМИЦ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова» Минздрава России, Москва

Ключевые слова:

клеточная культура, эндотелий роговицы, кератоциты, задний послойный трансплантат роговицы, среда для хранения роговицы

Аннотация

Цель. Сравнить переживаемость кератоцитов и клеток заднего
эпителия (эндотелия) донорской роговицы человека в усовершенствованной среде для хранения и оптимизации гидратации роговицы.
Материал и методы. Использованы 2D-клеточные культуры кератоцитов и эндотелиальных клеток роговицы, культивированных в
модифицированной консервационной среде в течение 14 и 7 сут.
соответственно. Для подтверждения характерного фенотипа клеток
проведено иммуноцитохимическое исследование к следующим маркерам: для кератоцитов – Люмикан, Кератокан и α-гладкомышечный
актин; для эндотелиальных клеток – ZO-1 и Na/K-АТФаза. Для детекции запуска апоптоза в клеточной культуре кератоцитов исследовали
Цитохром С, BAX, а также Каспазы 3 и 8. Подтверждение жизнеспособности клеточных культур после культивирования проводили с использованием набора «Live and Dead». Морфологию эндотелиальных
клеток изучали при помощи электронного сканирующего микроскопа.
Результаты. 2D-культура кератоцитов, культивируемая в исследуемой среде, экспрессировала характерные маркеры: Люмикан, Кератокан и не экспрессировала α-гладкомышечный актин. Маркеров
апоптоза в клеточной культуре кератоцитов спустя 14 сут. культивирования выявлено не было. При исследовании культуры эндотелия роговицы, культивируемой в течение 7 сут., выявлена экспрессия ZO-1 и
Na/K-АТФазы, а также сохранение характерной гексагональной морфологии клеток по данным электронной микроскопии.
Заключение. Усовершенствованная среда для консервации роговицы обеспечивает сохранение уникального фенотипа кератоцитов, а также оказывает незначительное влияние на пролиферативную
активность данных клеток в течение 14 суток. Среда сохраняет жизнеспособность и функциональную активность эндотелия роговицы как минимум до 7 суток культивирования.

Библиографические ссылки

Terry MA. Endothelial keratoplasty: history, current state, and future, directions. Cornea. 2006;25(8): 873–878. doi: 10.1097/01.ico.0000244869.54761.50

Мамиконян В.Р., Труфанов C.B. Автоматизированная задняя послойная кератопластика в лечении буллезной кератопатии. Бюллетень СО РАМН. 2009;138(4): 37–39. [Mamikonyan VR, Trufanov CB. Avtomatizirovannaya zadnyaya posloynaya keratoplastika v lechenii bulleznoy keratopatii. The Bulletin of Siberian Branch of Russian Academy of Medical Sciences. 2009;138(4): 37–39. (In Russ.)]

Малюгин Б.Э., Мороз З.И., Борзенок С.А., Дроздов И.В., Айба Э.Э., Паштаев А.Н. Первый опыт и клинические результаты задней автоматизированной послойной кератопластики (ЗАПК) с использованием предварительно выкроенных кон-

сервированных ультратонких роговичных трансплантатов. Офтальмохирургия. 2013;3: 12–16. [Malyugin BE, Moroz ZI, Borzenok SA, Drozdov IV, Aiba EE, Pashtaev AN. First experience and clinical results of DSAEK utilizing the pre-cut ultrathin grafts. Fyodorov Journal of Ophthalmic Surgery. 2013;3: 12–16. (In Russ.)]

Оганесян О.Г. Система хирургической реабилитации пациентов с эндотелиальной патологией роговицы: дис. … докт. мед. наук. М.; 2011. [Oganesyan OG. The system of surgical rehabilitation of patients with corneal endothelial pathology [Dissertation]. M.; 2011. 5. Патент РФ на изобретение № 2676311С1

/ 27.12.2018. Борзенок С.А., Малюгин Б.Э., Тонаева Х.Д., Ахмедов А.К., Керимов Т.З., Комах Ю.А., Белодедова А.В., Литвинов А.В. Средство консервации заднего послойного трансплантата роговицы. Доступно по: https://patenton.ru/patent/RU2676311C1

[Ссылка активна на 19.05.2021]. [Patent RUS № 2676311С1. Borzenok SA, Malyugin BE, Tonaeva HD, Ahmedov AK, Kerimov TZ, Komakh YuA, Belodedova AV, Litvinov AV. A means of preserving a posterior layered corneal graft Available from: https://patenton.

ru/patent/RU2676311C1 [Accessed 19th May 2021 (In Russ.)]

Тонаева Х.Д., Ахмедов А.К., Комах Ю.А., Малюгин Б.Э., Борзенок С.А. Результаты разработки консервационной среды для предоперационной подготовки ультратонкого трансплантата рговицы. Вестник трансплантологии и искусственных органов. 2018;20: 165. [Tonaeva HD, Ahmedov AK, Komakh YuA, Malyugin BE, Borzenok SA. Results of the development of a conservational environment for preoperative preparation of an ultrathin corneal graft. Russian Journal of Transplantology and Artificial Organs.

;20: 165. (In Russ.)]

Travella J, Shah V, Davidson R. Ultrathin DSAEK. Int Ophthalmol. 2013;53(2): 21–30. doi: 10.1097/ IIO.0b013e31827823a8

Turnbull J, Tsatsos M, Hossain PN, Anderson DF. Determinants of visual quality after endothelial keratoplasty. Surv Ophthalmol. 2016;61: 257–271. doi: 10.1016/j.survophthal.2015.12.006

Werner L, Wilbanks G, Nieuwendaal C. Localized opacification of hydrophilic acrylic intraocular lenses after procedures using intracameral injection of air or gas. J Cataract Refract Surg. 2015;41(1): 199–207.

Waite A, Davidson R, Taravella MJ. DSAEK Donor tissue preparation using a double pass microkeratome technique. J Cataract Refract Surg. 2013;39(3): 446–450. doi: 10.1016/j.jcrs.2012.10.048

Vignola R, Giurgola L, Colabelli Gisoldi RAM, Gaudio M, D’Amato Tóthová J, Pocobelli A. Monitoring the microbial contamination of donor cornea during all preservation phases: а prospective study in the Eye Bank of Rome. Transpl Infect Dis. 2019;21(2): 13041. doi:

1111/tid.13041

Lubatschowski H, Kermani O, Otten C, Yaller A, Schmiedt KC, Ertmer W. ArF-excimer laser-induced secondary radiation in photoablation of biological tissue. Lasers Surg Med. 1994;14(2): 168–177.

Малюгин Б.Э., Шилова Н.Ф., Антонова О.П., Анисимова Н.С., Шормаз И.Н. Сравнительный анализ клинико-функциональных результатов задней послойной кератопластики с использованием фемтосекундного лазера и микрокератома. Офталь-

мохирургия. 2019;1: 20–26 [Malyugin BE, Shilova NF, Antonova OP, Anisimova NS, Shormaz IN. Clinical and functional results following femtosecond laser-assisted DSEK versus microkeratome-assisted DSAEK surgeries. A comparative study. Fyodorov Journal of Ophthalmic Surgery. 2019;1: 20–26. (In Russ.) doi: 10.25276/0235-4160-2019-1-20-26

Патент РФ на изобретение № 2069951 C1 /26.02.1993. Федоров С.Н., Мороз З.И., Борзенок С.А., Комах Ю.А. Среда для консервации роговицы глаза. [Patent RUS № 2069951 C1 / 26.02.1993. Fedorov SN. Moroz ZI, Borzenok SA, Komakh JuA. Medium for eye cornea conservation. (In Russ.)]

Загрузки

Опубликован

2022-01-09

Выпуск

Раздел

Статьи

Наиболее читаемые статьи этого автора (авторов)

1 2 3 4 5 > >>