Исследование клеточного состава богатой тромбоцитами плазмы для оптимизации ее использования в хирургии макулярных разрывов. Часть 1

Авторы

  • А.Ю. Клейменов Екатеринбургский центр МНТК «Микрохирургия глаза», Екатеринбург
  • В.Н. Казайкин Екатеринбургский центр МНТК «Микрохирургия глаза», Екатеринбург
  • Н.С. Демченко Екатеринбургский центр МНТК «Микрохирургия глаза», Екатеринбург
  • А.В. Шалагин Екатеринбургский центр МНТК «Микрохирургия глаза», Екатеринбург
  • А.С. Козлова Екатеринбургский центр МНТК «Микрохирургия глаза», Екатеринбург

Ключевые слова:

макулярный разрыв, обогащенная тромбоцитами плазма, тромбоциты, лейкоциты

Аннотация

Актуальность. В настоящее время использование богатой тромбоцитами плазмы крови (БоТП) является одним из успешных направлений тканевой инженерии и клеточной терапии в медицине. БоТП активно применяется в офтальмохирургии, в частности, для закрытия макулярного разрыва (МР). Цель. Исследовать клеточный состав БоТП для оптимизации ее использования в хирургии макулярного разрыва.
Материал и методы. В настоящем исследовании представлены результаты анализа БоТП 20 пациентов (6 мужчин и 14 женщин), прооперированных в АО «Екатеринбургский центр МНТК «Микрохирургия глаза» в период с апреля по июль 2021 г. по поводу сквозного макулярного разрыва. Возраст пациентов составил от 57 до 82 лет (69,0±1,2 года). Для получения БоТП использовалась Ycellbio-Kit. При центрифугировании получались 2 основные фракции крови: плазма и эритроцитарный слой (эритромасса). Исследование содержимого пробирки проводилось на 4 уровнях. Основное внимание было уделено количественному составу тромбоцитов и лейкоцитов, которые являются наиболее важными и значимыми при хирургии МР.
Результаты. В результате проведенного исследования были получены следующие показатели тромбоцитов и лейкоцитов в общем анализе крови (ОАК) и БоТП. Концентрация тромбоцитов в ОАК составила от 140 до 285∙10³/мкл (215,85±9,23), P-PRP (чистая БоТП) – от 699 до 5681∙10³/мкл (2600,4±329,9), L-PRP (ЛТС-плазма, содержащая тромбоциты и лейкоциты) – от 1995 до
9989∙10³/мкл (6555,8±506,7) (p<0,001). Концентрация лейкоцитов в ОАК составила от 3,83 до 7,73∙10³/мкл (5,58±0,29), P-PRP – от 0,02 до 7,08∙10³/мкл (1,49±0,58), L-PRP – 6,12–494,69∙ 10³/мкл (99,3±38,1) (p<0,01).
Заключение. БоТП обладает регенераторной активностью и контрактильными свойствами в обеих фракциях – в P-PRP и L-PRP (ЛТС), что упрощает процесс забора БоТП из пробирки и расширяет возможности для ее применения в хирургии МР и другой патологии сетчатки, связанной с ретинальными дефектами. С учетом наименьшей концентрации лейкоцитов фракция P-PRP, возможно, является оптимальной для хирургии МР.

Библиографические ссылки

1. Болдырева О.В., Вахрушев С.Г., Торопова Л.А. Применение плазмы, обогащенной тромбоцитами, в медицинской практике. Современные проблемы науки и образования. 2016;5. [Boldyreva OV, Vakhrushev SG, Toropova LA. The use of plasma enriched with platelets in medical practice. Modern problems of science and education. 2016;5. (In Russ.)]

Rosenthal AR, Harbury C, Egbert PR, Rubenstein E. Use of a platelet-fibrinogen-thrombin mixture as a corneal adhesive: experiments with sutureless lamellar keratoplasty in the rabbit. Invest Ophthalmol. 1975;14(11): 872–875.

3. Лошкарева А.О., Майчук Д.Ю. Применение богатой тромбоцитами плазмы у пациентов с хроническими эрозиями роговицы. Современные технологии в офтальмологии. 2016;4: 131–132. [Loshkareva AO, Maychuk D.Yu. Use of Platelet-rich Plasma in Patients with Chronic Corneal Erosions. Modern technologies in ophthalmology. 2016;4: 131–132. (In Russ.)]

4. Арбеньева Н.С., Братко В.И., Братко Г.В., Трунов А.Н., Повещенко О.В., Черных В.В. Результаты применения аутологичной плазмы, обогащенной тромбоцитами, в составе комплексной схемы лечения увеита, ассоциированного с системными заболеваниями, сопровождающегося макулярным отеком. Офтальмохирургия. 2020;2: 20–25. [Arbenyeva NS, Bratko VI, Bratko GV, Trunov AN, Poveshchenko OV, Chernykh VV. The results of the use of autologous platelet-rich plasma as part of a comprehensive treatment regimen for uveitis associated with systemic diseases and accompanied by macular edema. Fyodorov Journal of Ophthalmic Surgery. 2020;2: 20–25. (In Russ.)]. doi: 10.25276/0235-4160 2020-2-20-25

5. Станишевская О.М., Черных В.В., Братко В.И. Сочетанная методика и ее клинико-патогенетическая оценка в лечении центральной серозной хориоретинопатии с использованием субпорогового микроимпульсного лазерного воздействия длиной волны 577 нм в сочетании инъекциями тромбоцитарной аутоплазмы. Acta Biomedica Scientifica. 2019;4(4):134-138. [Stanishevskaya OM, Chernykh VV, Bratko VI. Combined technique and its clinical and pathogenetic evaluation in treatment of central serous chorioretinopathy using subthreshold microimpulse laser irradiation with a wavelength of 577 nm in combination with injections of platelet autoplasma. Acta Biomedica Scientifica. 2019;4(4): 134–138. (In Russ.)]. doi: 10.29413/ABS.2019-4.4.21

6. Paques M, Chastang C, Mathis A, et al. Effect of autologous platelet concentrate in surgery for idiopathic macular hole: results of a multicenter, double-masked, randomized trial. Platelets in macular hole surgery group. Ophthalmology. 1999;106(5): 932–938.

7. Арсютов Д.Г. Использование аутологичной кондиционированной плазмы, обогащенной тромбоцитами, в хирургии регматогенной отслойки сетчатки с центральным и периферическими разрывами. Acta Biomedica Scientifica. 2019;4(4): 61–65. [Arsyutov DG. Use of autologous conditioned platelet rich plasma in the surgery of rhegmatogenous retinal detachment with central and peripheral tears. Acta Biomedica Scientifica. 2019;4(4): 61–65. (In Russ.)]. doi: 10.29413/ ABS.2019-4.4.8

8. Шкворченко Д.О., Захаров В.Д., Шпак А.А. и др. Наш первый опыт применения богатой тромбоцитами плазмы крови в хирургии макулярных разрывов. Современные технологии в офтальмологии. 2016;1(9): 245–246. [Shkvorchenko DO, Zakharov VD, Shpak AA, et al. Our first experience in the use of platelet-rich blood plasma in the surgery of macular ruptures. Modern technologies in ophthalmology. 2016;1(9): 245–246. (In Russ.)]

9. Everts P, Onishi K, Jayaram P, Lana JF, Mautner K. Platelet-Rich Plasma: New performance understandings and therapeutic considerations in 2020. Int J Mol Sci. 2020;21(20): 7794. doi: 10.3390/ijms21207794

10. Попов Е.М., Куликов А.Н., Чурашов С.В., Гаврилюк И.О., Егорова Е.Н., Аббасова А.И. Сравнение показателей получаемой разными способами аутоплазмы, используемой для лечения пациентов с макулярным разрывом. Офтальмологические ведомости. 2021; 14(4): 27–34. [Popov EM, Kulikov AN, Churashov SV, Gavrilyuk IO, Egorova EN, Abbasova AI. Comparison of indicators of autologous serum obtained by different methods and used for the treatment of macular hole. Ophthalmology Reports. 2021;14(4): 27–34. (In Russ)]. doi: 10.17816/OV89413

11. Dohan Ehrenfest DM, Rasmusson L, Albrektsson T. Classification of platelet concentrates: From pure platelet-rich plasma (P-PRP) to leucocyteand platelet-rich fibrin (L-PRF). Trends 12. Biotechnol. 2009;27(3): 158–167. doi: 10.1016/j.tibtech.2008.11.009

12. Marx RE. Platelet-rich plasma (PRP): what is PRP and what is not PRP? Implant Dent. 2001;10(4):225-8. doi: 10.1097/00008505-200110000-00002

13. Медведев В.Л., Коган М.И., Михайлов И.В., Лепетунов С.Н. Аутологичная плазма, обогащенная тромбоцитами: что это и для чего? Вестник урологии. 2020;8(2): 67–77. [Medvedev VL, Kogan MI, Mihailov IV, Lepetunov S.N. Platelet-rich autologous plasma: what is it and for what? Urology Herald. 2020;8(2): 67–77. (In Russ.)]. doi: 10.21886/2308-6424-2020-8-2-67-77

14. Колосова Е.Н., Василенко И.А., Ковалева Л.Г. Оценка морфофункционального состояния тромбоцитов у больных идиопатической тромбоцитопеничской пурпурой методом витальной компьютерной морфометрии. Сибирский научный медицинский журнал. 2011;31(2): 58 63. [Kolosova EN, Vasilenko IA, Kovaleva LG. Assessment of morphofunctional condition of platelets of patients with idiopathic thrombotcytopenic purpura by method of vital computer morphometry. The Siberian Scientific Medical Journal. 2011;31(2): 58–63. (In Russ.)]

15. Макаров М.С. Особенности морфофункционального статуса тромбоцитов человека в норме и патологии. Дисс. …канд. биол. наук. М.; 2014. [Makarov MS. Features of the morphofunctional status of human platelets in norm and pathology [Dissertation]. Moscow; 2014.

16. Guder WG, Narayanan S, Wisser H, Zawta B. Special aspects of haematological analysis: diagnostic samples: from the patient to the laboratory. The impact of preanalytical variables on the quality of laboratory results. 4th ed. Berlin: Wiley-Blackwell, Publications; 2009.

17. Weiser L, Bhargava M, Attia E, Torzilli PA. Effect of serum and platelet-derived growth factor on chondrocytes grown in collagen gels. Tissue Eng. 1999;5(6): 533–544. doi: 10.1089/ten.1999.5.533

18. Куликов А.Н., Чурашов С.В., Попов Е.М. Методы лечения макулярного разрыва – история и перспективы. Вестник Национального медико-хирургического центра им. Н.И. Пирогова. 2021;1: 135–138. [Kulikov AN, Churashov SV, Popov EM. Methods of treatment of macular hole: history and prospects. Bulletin of Pirogov National Medical & Surgical Center. 2021;1: 135–138 (In Russ.)] doi: 10.25881/BPNMSC.2021.14.53.026

19. Rizzo S, Tartaro R, Barca F, Caporossi T, Bacherini D, Giansanti F. Internal limiting membrane peeling versus inverted flap technique for treatment of full-thickness macular holes: a comparative study in a large series of patients. Retina. 2018;38 Suppl 1: S73–S78. doi: 10.1097/ IAE.0000000000001985

20. Schaub F, Gözlügöl N, von Goscinski C, Enders P, Heindl LM, Dahlke C. Outcome of autologous platelet concentrate and gas tamponade compared to heavy silicone oil tamponade in persistent macular hole surgery. Eur J Ophthalmol. 2021;31(2): 664–672. doi: 10.1177/1120672120903704

21. Базлов C.Б., Мелконян К.И., Русинова Т.В., Попандопуло К.И., Марченко Н.В., Шевчук Д.Д. К вопросу о получении плазмы, обогащенной тромбоцитами. Инновационная медицина Кубани. 2022;(1): 38–43. [Bazlov SB, Melkonian KI, Rusinova TV, Popandopulo KI, Marchenko NV, Shevchuk DD. On the issue of obtaining platelet-rich plasma. Innovative Medicine of Kuban. 2022;(1): 38–43. (In Russ.)] doi: 10.35401/2500-0268- 2022-25-1-38-43

22. Sánchez M, Andia I, Anitua E, et al. Platelet rich plasma (PRP) biotechnology: concepts and therapeutic applications in orthopedics and sports medicine. Innovations in Biotechnology. 2012:113–138. doi: 10.5772/28908

23. Sun S, Urbanus RT, Ten Cate H, de Groot PG, de Laat B, Heemskerk JWM, Roest M. Platelet activation mechanisms and consequences of immune thrombocytopenia. Cells. 2021;10(12): 3386. doi: 10.3390/ cells10123386

24. Fernández DI, Kuijpers MJ, Heemskerk JW. Platelet calcium signaling by G-protein coupled and ITAM-linked receptors regulating anoctamin-6 and procoagulant activity. Platelets. 2021;32: 863–871. doi: 10.1080/09537104.2020.1859103

25. Saad Setta H, Elshahat A, Elsherbiny K, Massoud K, Safe I. Plateletrich plasma versus platelet-poor plasma in the management of chronic diabetic foot ulcers: a comparative study. Int Wound J. 2011;8(3): 307–312. doi: 10.1111/j.1742-481X.2011.00797

26. McCarrel TM, Minas T, Fortier LA. Optimization of leukocyte concentration in platelet-rich plasma for the treatment of tendinopathy. J Bone Joint Surg Am. 2012;94(19): e143(1–8). doi: 10.2106/JBJS.L.00019

27. DeLong J, Beitzel K, Mazzocca A, Shepard D, Roller B, Hanypsiak B. Update on platelet-rich plasma. Current Orthopaedic Practice: November/ December. 2011;22 (6): 514–523. doi: 10.1097/BCO.0b013e318236bd55

28. Tohidnezhad M, Varoga D, Wruck CJ, Podschun R, Sachweh BH, Bornemann J, Bovi M, Sönmez TT, Slowik A, Houben A, Seekamp A, Brandenburg LO, Pufe T, Lippross S. Platelets display potent antimicrobial activity and release human beta-defensin 2. Platelets. 2012;23(3): 217–223. doi: 10.3109/09537104.2011.610908

Загрузки

Опубликован

2023-07-11

Наиболее читаемые статьи этого автора (авторов)