Экспериментальное обоснование использования 1% раствора гидроксипропилметилцеллюлозы для защиты эндотелия заднего послойного трансплантата роговицы при его выкраивании низкоэнергетическим фемтосекундным лазером по инвертированной методике
Ключевые слова:
эндотелий, кератоциты, трансплантация роговицы, кератопластика, задняя послойная кератопластика, фемтосекундный лазер, вискоэластик, конфокальная микроскопия, сканирующая электронная микроскопия, гидроксипропилметилцеллюлозаАннотация
Цель. В эксперименте изучить степень повреждения эндотелия роговицы при инвертированном методе выкраивания заднего послойного трансплантата роговицы фемтосекундным лазером (ФСЛ) с или без использования вискоэластика (ВЭ) – 1% раствора гидроксиметилпропилцеллюлозы (ГПМЦ).
Материал и методы. Использовали корнеосклеральные диски, выкроенные из свежеэнуклеированных свиных глаз. Формировали задние послойные трансплантаты роговицы с помощью ФСЛ модели LDV Z8 (Ziemer, Швейцария). В контрольной группе (n=16) непосредственно перед аппланацией на эндотелий наносили нескольких капель среды для хранения роговиц, а в опытной группе (n=16) – 1% раствор ГПМЦ. Проводили контроль качества аппланации и состояние зоны интерфейса при помощи оптического когерентного томографа, интегрированного в лазер (ФЛ-ОКТ). Далее определяли жизнеспособность эндотелиальных клеток (ЭК) методом окраски флуоресцентным красителем и исследовали трансплантаты на конфокальном лазерном сканирующем микроскопе. Проводили подсчет живых и мертвых эндотелиальных клеток.
Для оценки состояния коллагеновых волокон стромальной стороны трансплантата образцы исследовали на сканирующем электронном микроскопе (СЭМ).
Результаты. По данным ФЛ-ОКТ, в ходе аппланации во всех образцах опытной и контрольной групп отмечали ровный профиль зоны контакта между головкой лазера и ЭК. Живых ЭК в контроле было 2854 [2819; 2879] кл/мм2, а в опыте – 3477 [3426; 3719] кл/мм2 (p<0,001). Количество мертвых ЭК в контрольной группе было на 9,92±1,11% больше, чем в опытной, и составляло 710 [649; 728] и 402 [366; 427] кл/мм2 соответственно (p<0,001). При анализе
изображений, полученных на СЭМ, отмечали сохранность архитектоники коллагеновых волокон с единичными их разволокнениями в обеих группах.
Заключение. Нанесение слоя 1% раствора ГПМЦ обеспечивает защиту эндотелия роговичного трансплантата на этапе выкраивания его ФСЛ по инвертированной методике. В исследуемой группе количество ЭК было на 9,92% выше, чем в контрольной группе. Нахождение слоя ВЭ в интерфейсе между головкой ФСЛ и ЭК не влияло на формирование эффективного лазерного реза и не снижало качество стромальной поверхности трансплантата. Инвертированная методика заготовки трансплантата роговицы ФСЛ с использованием 1% раствора ГПМЦ на поверхности ЭК может быть рекомендована для использования в клинической практике.
Библиографические ссылки
1. Tan DT, Mehta JS. Future directions in lamellar corneal transplantation. Cornea. 2007;26: S21–S28.
2. Рикс И.А., Папанян С.С., Астахов С.Ю., Новиков С.А. Новая клинико-морфологическая классификация эндотелиально-эпителиальной дистрофии роговицы //Офтальмологические ведомости. 2017;10(3): 46–52.
3. Dunker SL, et al. Practice patterns of corneal transplantation in Europe: first report by the European Cornea and Cell Transplantation Registry. J Cataract Refract Surg. 2021;47(7): 865–869.
4. Dubord PJ, Evans GD, Macsai MS, Mannis MJ, Glasser DB, Strong DM, et al. Eye banking and corneal transplantation communicable adverse incidents: current status and project NOTIFY. Cornea. 2013;32(8): 1155–1166.
5. Gorovoy MS. Descemet-stripping automated endothelial keratoplasty. Cornea. 2006;25(8): 886–889.
6. Shilova NF, et al. Refractive outcomes following cataract combined with lamellar keratoplasty: femtosecond-DSEK versus microkeratome- DSAEK. Int Ophthalmol. 2021;41: 639–647.
7. Hjortdal J, Nielsen E, Vestergaard A, Søndergaard A. Inverse cutting of posterior lamellar corneal grafts by a femtosecond laser. Open Ophthalmol J. 2012;6: 19.
8. Погорелова С.С., Ченцова Е.В., Грдиканян А.А., Милаш С.В., Оганесян О.Г. Анализ плотности эндотелиальных клеток в среднесрочный период наблюдения после эндотелиальной кератопластики с формированием трансплантата фемтосекундным лазером со стороны эндотелия. Российский медицинский журнал. 2016;22(1): 10–13. [Pogorelova SS, Chentsova EV, Grdikanyan AA, Milash SV, Oganesyan OG. Analysis of endothelial cell density in the medium-term follow-up period after endothelial keratoplasty with femtosecond laser graft formation from the endothelium. Medical Journal of the Russian Federation. 2016;22(1): 10–13. (In Russ.)]
9. Rosa AM, Silva MF, Quadrado MJ, Costa E, Marques I, Murta J. N. Femtosecond laser and microkeratome-assisted Descemet stripping endothelial keratoplasty: first clinical results. Br J Ophthalmol. 2013;97(9): 1104–1107.
10. Малюгин Б.Э. и др. Сравнительный анализ клинико-функциональных результатов задней послойной кератопластики с использованием фемтосекундного лазера и микрокератома. Офтальмохирургия. 2019;1: 20–26. [Malyugin BE, et al. Comparative analysis of clinical and functional results of posterior layered keratoplasty using femtosecond laser and microkeratome. Fyodorov Journal of Ophthalmic Surgery. 2019;1: 20– 26. (In Russ.)]
11. Оганесян О.Г. и др. Результаты сканирующей электронной микроскопии ультратонкого эндокератотрансплантата, сформированного фемтосекундным лазером со стороны эндотелия. Российский медицинский журнал. 2018;24(1): 19–24. [Oganesyan OG, et al. The results of scanning electron microscopy of an ultrathin endoceratograft formed by a femtosecond laser from the endothelium. Medical Journal of the Russian Federation. 2018;24(1): 19–24. (In Russ.)]
12. Нероев В.В. и др. Первый опыт и краткосрочные результаты фемтолазерной задней кератопластики (DSEK) с формированием трансплантата с эндотелиальной стороны. Российский медицинский журнал. 2013;5: 43–46. [Neroev VV, et al. The first experience and short-term results of femtolaser posterior keratoplasty (DSEK) with graft formation from the endothelial side. Medical Journal of the Russian Federation. 2013;5: 43–46. (In Russ.)]
13. Погорелова С.С., Оганесян О.Г., Ченцова Е.В. Среднесрочные биологические и функциональные результаты эндотелиальной кератопластики (DSEK) с формированием трансплантата фемтосекундным лазером со стороны эндотелия. Российский медицинский журнал. 2015;21(4): 9–12. [Pogorelova SS, Oganesyan OG, Chentsova EV. Medium-term biological and functional results of endothelial keratoplasty (DSEK) with femtosecond laser graft formation from the endothelium. Medical Journal of the Russian Federation. 2015;21(4): 9–12. (In Russ.)]
14. Liu Y, Teo E, Adnan K, Yam G, Peh G, Tan D, Mehta J. Endothelial approach ultrathin corneal grafts prepared by femtosecond laser for descemet stripping endothelial keratoplasty. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2014;55(12): 8393–8401.
15. Патент РФ на изобретение № 2758028/25.10.2021. Бюл. №30. Малюгин Б.Э., Ткаченко И.С., Гелястанов А.М., Калинникова С.Ю. Способ проведения задней послойной кератопластики с помощью фемтосекундного лазера. Доступно по: https://patents.s3.yandex.net/RU2758028C1_20211025.pdf [Ссылка активна на 16.08.2023] [Patent RUS № 2758028/25.10.2021. Byul. №30. Malyugin BE, Tkachenko IS, Gelastanov AM, Kalinnikova SYu. Method of posterior layered keratoplasty using femtosecond laser. Available from: https://patents. s3.yandex.net/RU2758028C1_20211025.pdf [Accessed 16th August 2023] (In Russ.)]
16. Böhringer D, et al. Influencing factors on chronic endothelial cell loss characterized in a homogeneous group of patients. Br J Ophthalmol. 2002;86(1): 35–38.
17. Mehta JS, Shilbayeh R, Por YM, Cajucom-Uy H, Beuerman RW, Tan DT. Femtosecond laser creation of donor cornea buttons for Descemetstripping endothelial keratoplasty. J Cataract Refract Surg. 2008;34(11): 1970–1975.
18. Sikder S, Snyder RW. Femtosecond laser preparation of donor tissue from the endothelial side. Cornea. 2006;25(4): 416–422.
19. Hjortdal J, Nielsen E, Vestergaard A, Søndergaard A. Inverse cutting of posterior lamellar corneal grafts by a femtosecond laser. Open Ophthalmol J. 2012;6: 19.
20. Cheng Y, et al. Quality of vision after femtosecond laser-assisted Descemet stripping endothelial keratoplasty and penetrating keratoplasty: a randomized, multicenter clinical trial. Am J Ophthalmol. 2011;152(4): 556–566.e1.
21. Kobayashi A, Mawatari Y, Yokogawa H, Sugiyama K. In vivo laser confocal microscopy after Descemet stripping with automated endothelial keratoplasty. Am J Ophthalmol. 2008; 145(6): 977–985.
Опубликован
Лицензия
Copyright (c) 2023 ОФТАЛЬМОХИРУРГИЯ
Это произведение доступно по лицензии Creative Commons «Attribution-NonCommercial» («Атрибуция — Некоммерческое использование») 4.0 Всемирная.
